<!doctype html public "-//W3C//DTD W3 HTML//EN">
<html><head><style type="text/css"><!--
blockquote, dl, ul, ol, li { padding-top: 0 ; padding-bottom: 0 }
 --></style><title>Re: [Histonet] Steiner and Steiner method/H.
pylori</title></head><body>
<div>Hi HistoNetters</div>
<div><br></div>
<div>There certainly is a Wrathin Starry microwave method to
demonstrate spirochetes, and it does not involve anything
radioactive.</div>
<div><br></div>
<div>Here is Joyce Moore's version, as it was taught to me:</div>
<div><br></div>
<div><font face="Charcoal" color="#000000">&nbsp;Warthin Starry
Techniques for Spirochetes<br>
<br>
Fixation: Formalin<br>
<br>
Technique: Sections cut at 4 microns<br>
<br>
Control: Tissue containing Spirochetes<br>
<br>
Solutions:<br>
<br>
Acidulated WaterAcidulate 1 liter distilled water with 0.1 g citric
acid until pH of 3.8-4.4 is reached. A pH of 4.0 is ideal for staining
spirochetes. For demonstrating Donovan Bodies of granuloma inguinale,
a pH of 3.6 is recommended.<br>
<br>
2% Silver Nitrate Solution (developer)Silver nitrate C.P. crystals 0.5
gAcidulated water 25.0 ml<br>
<br>
1% Silver Nitrate Solution (impregnation)Silver nitrate C.P. crystals
0.5 gAcidulated water 50.0 ml<br>
<br>
0.5% Hydroquinone SolutionHydroquinone crystals, photographic quality
0.35 gAcidulated water 25.0 ml<br>
<br>
5% Gelatin SolutionGelatin 1.5 gAcidulated water 25.0 ml<br>
<br>
Staining Procedure<br>
<br>
&nbsp;&nbsp; 1. Attach slides to automatic stainer, deparaffinize,
hydrate to water.<br>
&nbsp;&nbsp; 2. Rinse in distilled water, 2 changes.<br>
&nbsp;&nbsp; 3. Place slides in 1% silver nitrate solution for 45
seconds in microwave. Let stand for 1 minute at room temperature.
(Note: alternatively, in a laboratory microwave, heat at 80% power, 60
C for 5 minutes, no standing time required).<br>
&nbsp;&nbsp; 4. Preheat for 45 seconds in microwave in separate
flasks: 2% silver nitrate, 5% gelatin, 0.15% hydroquinone. Preheat
empty flask in microwave with these.<br>
&nbsp;&nbsp; 5. Mix developer solution in order given: Use warm empty
flask:<br>
<br>
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; 2% silver nitrate 1.5 ml5% gelatin 3.75
ml0.15% hydroqinone 2.0 ml<br>
&nbsp;&nbsp; 6. When step 5 is completed, remove slides from silver
solution. Do not rinse. Place slides horizontally on a slide rack and
cover with developer. Allow sections to develop until they are light
yellow to golden brown, approximately 1 minute or less. (Note:
developing step can also be carried out in a laboratory microwave at
80% power set for 60 C for 20 seconds).<br>
&nbsp;&nbsp; 7. Rinse thoroughly in 50 ml tap water which is preheated
to approximately 56 C in the microwave at 450W for 45 seconds.<br>
&nbsp;&nbsp; 8. Rinse in distilled water.<br>
&nbsp;&nbsp; 9. Attach to automatic stainer, dehydrate and clear.
Mount in a xylene soluble mounting medium.<br>
<br>
Results:<br>
<br>
Spirochetes - blackBackground - pale yellow to light brown<br>
<br>
Adapted for the Jefferson Regional Medical Center Histo-Path
Laboratory</font></div>
<div><br></div>
<div><br></div>
<div>best regards,</div>
<div>Steven Slap</div>
<div>At 4:30 PM -0500 12/9/03, Derek and/or Lynda Leopold wrote:</div>
<blockquote type="cite" cite>Hi list,<br>
Would anyone care to comment on the Steiner and Steiner (microwave)
method for spirochetes?&nbsp; I susupect my lab's pathologists are
interested in it for viewing H. pylori, yet in all the &quot;HP&quot;
talk on this list I have yet to hear it mentioned.&nbsp; How does it
compare from a tech safety standpoint?&nbsp; As a brand-new tech, I
still do crazy things like read the safety warnings on ingredients,
and that whole uranyl nitrate radioactive thing is sort of bothering
me.&nbsp; We use no protective equipment when doing this stain (which
the doctors still call &quot;Warthin Starry&quot;, incidentally, but
hey---they're making the big bucks....)<br>
I'll take anyone's 2 cents...<br>
Thanks,<br>
Lynda Leopold<br>
<br>
<br>
_______________________________________________<br>
Histonet mailing list<br>
Histonet@lists.utsouthwestern.edu<br>
http://lists.utsouthwestern.edu/mailman/listinfo/histonet</blockquote>
<div><br></div>
</body>
</html>