<!DOCTYPE HTML PUBLIC "-//W3C//DTD HTML 4.0 Transitional//EN">
<HTML><HEAD>
<META http-equiv=Content-Type content="text/html; charset=iso-8859-1">
<META content="MSHTML 5.50.4134.100" name=GENERATOR>
<STYLE></STYLE>
</HEAD>
<BODY bgColor=#ffffff>
<DIV><FONT face=Arial size=2>1. Make certain that it is hematopoetic bone. That 
is, bone with&nbsp;marrow (RBC, WBC, etc.). Vertebrae, rib, or sternum are fine. 
But NOT adult femur heads, or bones from arms or legs from amputations from 
adults. These are all fat and connective tissue. No iron stores in these bones 
in adults.</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2></FONT>&nbsp;</DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>2. Use a mild decal for minimal time. We like to 
use FASC (formic acid, sodium citrate) for 2-3 days. Stronger acids tend to 
leach out the iron stores. If using hydrochloric or nitric acids, use 5% for a 
few hours to overnight, depending upon the size (see #3).</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2></FONT>&nbsp;</DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>3. Use minimum size. The larger the size you gross, 
the longer it has to be in decal, and the&nbsp;more iron that gets leached out. 
The HTL exam asks for bone 1 cm long. There is no requirement for width. So at 
needle core biopsy would be acceptable, as long as there is cortex and 
hematopoetic marrow.</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2></FONT>&nbsp;</DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>4. Realize that not all adults have large amounts 
of iron stores. If you are getting it from an autopsy from someone who has been 
sick a long time, or who has been undergoing treatment for cancer, they may have 
very little to no iron stores. Try several different sources.</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2></FONT>&nbsp;</DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>5. Make certain the formalin is OK. Acidic formalin 
will also leech out the iron, so use newly made, buffered formalin. And fix for 
minimal time. If the bone is being stored in formalin for a length of time 
(weeks to months), the formalin can go acidic also.</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2></FONT>&nbsp;</DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>Just some hints we've learned along the 
way.</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2></FONT>&nbsp;</DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>Peggy A. Wenk, HTL(ASCP)SLS</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>School of Histologic Technicians and 
Histotechnologists</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>William Beaumont Hospital</FONT></DIV>
<DIV><FONT face=Arial size=2>Royal Oak, MI</FONT></DIV>
<BLOCKQUOTE 
style="PADDING-RIGHT: 0px; PADDING-LEFT: 5px; MARGIN-LEFT: 5px; BORDER-LEFT: #000000 2px solid; MARGIN-RIGHT: 0px">
  <DIV style="FONT: 10pt arial">----- Original Message ----- </DIV>
  <DIV 
  style="BACKGROUND: #e4e4e4; FONT: 10pt arial; font-color: black"><B>From:</B> 
  <A title=jeannie_heck@yahoo.com href="mailto:jeannie_heck@yahoo.com">Jeannie 
  Heck</A> </DIV>
  <DIV style="FONT: 10pt arial"><B>To:</B> <A 
  title=histonet@lists.utsouthwestern.edu 
  href="mailto:histonet@lists.utsouthwestern.edu">Histonet</A> </DIV>
  <DIV style="FONT: 10pt arial"><B>Sent:</B> Monday, August 18, 2003 3:27 
  PM</DIV>
  <DIV style="FONT: 10pt arial"><B>Subject:</B> [Histonet] Iron leaching out 
  during decal</DIV>
  <DIV><BR></DIV>
  <DIV>Please help! I am working on my HTL Practical test and I am required to 
  do a Prussian Blue iron stain on a 1.0 cm piece of bone. My problem is that 
  everything that I use to decal my bone (so that it cuts nicely) leaches out 
  all of the iron. HCL decal solutions were obviously too powerful (tried them 
  anyways) so I used a milder selection that included acetic acid (after fixing 
  w/ formaldehyde), and a combination of formic acid and formaldehyde (to fix 
  and decal in the same step). I am leary to get Zenker's solution (which was 
  recommended by Frieda Carson's <U>Histology: A Self Instructional Text</U>) 
  because if it doesn't work, then I am left with the expensive and arduous task 
  of disposing of the mercury. Does Zenker's really fix and decal effectively to 
  preserve the iron AND allow me to cut a nice section? What&nbsp;about 
  Zinc&nbsp;Chloride to replace the mercury in Zenker's? Any suggestions would 
  be greatly appreciated, I really need some help. Thank you!</DIV>
  <DIV>&nbsp;</DIV>
  <DIV>Bethany J. Krafels</DIV>
  <DIV>&nbsp;</DIV>
  <DIV>&nbsp;</DIV>
  <DIV>&nbsp;</DIV>
  <P>
  <HR SIZE=1>
  Do you Yahoo!?<BR><A 
  href="http://us.rd.yahoo.com/evt=10469/*http://sitebuilder.yahoo.com">Yahoo! 
  SiteBuilder</A> - Free, easy-to-use web site design 
software</BLOCKQUOTE></BODY></HTML>